PCR实验室的防污染与处理方法

PCR实验室的防污染方法

      试剂准备区、样本制备区和扩增区内的实验用品，包括移液器等器具应专用，空气、物品流向依次为：试剂准备区、样本制备区、扩增区、产物分析区，不可逆行。

实验超净台内进行

     1)实验的过程中选择最合适尺寸的手套并能及时更换，在进出不同实验区域或进行模板操作后都应更换实验服、口罩、帽子及手套，以避免不同实验区交叉污染。

      2)装有PCR试剂的反应管在打开之前应先瞬时离心，将管壁及管盖上的液体离至管底，降低污染手套或加样器的风险；谨慎开启反应管，防止管内液体溅出或形成气溶胶导致污染。

慢吸快打，分区摆放

       1）吸加试剂和模板的操作应严格按照规范要求进行，遵守“慢吸快打”原则，尽量一次性完成，忌多次抽吸，以避免气溶胶产生的交叉污染。

       2）实验试剂应与样品和PCR产物分开保存，不应放于同处。

注意：PCR扩增实验完成后及时将反应管取出，用一次性手套将产物反应管包裹丢弃，保证管盖紧闭。

PCR实验室的污染处理方法

1）严格按照说明书重复一遍实验，排除实验操作问题

2)   右图为空跑仪器后的正常曲线

1）打开一盒新的其他批次的试剂进行测试；

2）若结果正常，没有出现污染，则之前用的试剂操作中被污染；处理掉。

3）若结果依旧为污染后的结果，则继续下一步排查

①暂停所有实验操作；

②加大实验室的通风；

③对实验室内所有表面（台面、地面及墙面） 进行消毒；

④75%酒精或核酸去除剂空中喷雾；

⑤开启紫外消毒装置，延长紫外照射时间（4小时以上）；

以上措施每日进行，直至污染消除；用新试剂及确认无污染的器材进行原污染项目的试剂空白检测，连续3次均阴性后方可进行常规检测。