2021-09-22
一、阳性样本检测不出来,且阳性对照ct值靠后,原因是什么? 图1 图2答:图1与图2为同一试剂同一阳性对照的扩增结果;图1为金属浴加热后直接上机扩增,没进行上下颠倒混匀的步骤;图2是严格按照实验室操作,加热后颠倒混匀8-10次,离心后上机扩增;图2 ct值4左右,图1 ct值9左右...
2021-09-18
在PCR中,随着温度的变化发生变性-复性-延伸-三步为一个完整的循环。在MIRA(多酶恒温快速扩增)中,DNA双链的打开,引物与模板DNA链的结合,链的延伸复制,都是在恒温条件下靠酶来进行(重组酶单链结核蛋白,DNA聚合酶等),不同酶在同一时间执行各自功能,即一个反应管在同一时间内,同时在发生着双链打开、引物结合、链延伸这些步骤,而不是依赖温度每个阶段只能执行一个步骤,所以MIRA没有像PC...
2021-02-10
PCR实验室的防污染方法 试剂准备区、样本制备区和扩增区内的实验用品,包括移液器等器具应专用,空气、物品流向依次为:试剂准备区、样本制备区、扩增区、产物分析区,不可逆行。实验超净台内进行 1)实验的过程中选择最合适尺寸的手套并能及时更换,在进出不同实验区域或进行模板操作后都应更换实验服、口罩、帽子及手套,以避免不同实验区交叉污染。 2)装有PCR试剂的反应管在打开...
2021-02-09
污染,是PCR实验室出现实验假阳性、结果不可信、研发不可靠的重要推手,PCR实验室应当将防污染作为日常管理、实验安排、清洁消毒、实验习惯的核心。PCR 实验污染主要是核酸;因此所有的预防措施都会稍稍有所不同。“易查不易察”,污染来的悄无声息,我们该如何应对。今天给大家简单介绍一下PCR实验室的主要污染来源、实验中如何避免和减少污染的可能性及实验发生污染的应急处理方案。 ...